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植物細(xì)胞分化原理及其影響因素
[日期:2008-07-23]  來源:中國風(fēng)景園林網(wǎng)整理編輯  作者:   發(fā)表評論(0)打印



  植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞的差別之一就是植物細(xì)胞有全能性。植物細(xì)胞全能性(cell totipotency)的概念是1902年由德國著名植物學(xué)家Haberlandt首先提出的。他認(rèn)為,高等植物的器官和組織可以不斷分割直至單個(gè)細(xì)胞,每個(gè)細(xì)胞都具有進(jìn)一步分裂和發(fā)育的能力,并設(shè)想從一個(gè)體細(xì)胞可以得到人工培養(yǎng)的胚。20世紀(jì)50年代末由Saward等人從胡蘿卜根的韌皮部取下一塊組織,并將其置于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),使之分化出愈傷組織,然后把從愈傷組織所得到的胚狀體轉(zhuǎn)移到固體培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),從而獲得了完整的胡蘿卜試管植株。經(jīng)過栽培,此植株能夠正常生長開花結(jié)果,從而證實(shí)了Haberlandt的植物細(xì)胞具有“全能性”的設(shè)想。

  組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是植物細(xì)胞具有全能性,所謂細(xì)胞全能性是指每個(gè)植物的體細(xì)胞或性細(xì)胞都具有該植物的全套遺傳基因,因此在一定培養(yǎng)條件下每個(gè)細(xì)胞都可發(fā)育成一個(gè)與母體一樣的植株。要使細(xì)胞全能性表達(dá)出來,形成完整植株,除了生長以外,還要經(jīng)過分化、脫分化和再分化等過程。

  也就是說:一個(gè)植物細(xì)胞所具有的產(chǎn)生一個(gè)完整植株的固有能力稱作“細(xì)胞的全能性”。只要有一個(gè)完整的有生命力的細(xì)胞,即使這個(gè)細(xì)胞已經(jīng)是高度成熟和分化的細(xì)胞,也還保持著恢復(fù)到分生狀態(tài)的能力。其恢復(fù)過程取決于該細(xì)胞原來所處的自然部位,生理狀態(tài)以及外部環(huán)境條件的影響等。當(dāng)將離體組織或器官放在培養(yǎng)基上進(jìn)行離體培養(yǎng)(in vitro culture)時(shí),這些離體組織或器官就會進(jìn)行細(xì)胞分裂,形成一種高度液泡化的呈無定形態(tài)的薄壁細(xì)胞,稱為愈傷組織(callus)。

  一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài),并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象就稱為植物細(xì)胞的脫分化(differentiation)。脫分化過程的難易與植物種類、組織和細(xì)胞狀態(tài)有關(guān)。一般成年細(xì)胞和組織比幼年細(xì)胞和組織難;單倍體細(xì)胞比二倍體細(xì)胞難。切取的植物組織、器官和細(xì)胞,在人工培養(yǎng)條件下,可促進(jìn)脫分化,產(chǎn)生愈傷組織,然后將脫分化形成的愈傷組織轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),這些無定形的愈傷組織又會重新產(chǎn)生分生組織,繼而進(jìn)行形態(tài)建成,分化出具有根、莖、,最后形成完整植株。把這種原已分化的細(xì)胞,經(jīng)脫分化培養(yǎng)后再次進(jìn)行的分化現(xiàn)象叫再分化(redifferentiation)在有些情況下,再分化也可不經(jīng)愈傷組織階段,而直接發(fā)生于脫分化的細(xì)胞。

  利用植物細(xì)胞的全能性,可以培養(yǎng)出許多細(xì)胞。隨著細(xì)胞反復(fù)的分裂,培養(yǎng)中的愈傷組織和懸浮細(xì)胞一段時(shí)間后重新開始分化,產(chǎn)生不同類型的細(xì)胞。如:薄壁細(xì)胞、纖維細(xì)胞、導(dǎo)管和管胞、毛狀細(xì)胞、石細(xì)胞及色素細(xì)胞。在顯微鏡下易被觀察到的是有加厚的次生細(xì)胞壁的導(dǎo)管。因此,當(dāng)纖維細(xì)胞、導(dǎo)管和管胞、質(zhì)部等發(fā)生分化的過程也就是新植株重建的過程。

    在自然狀態(tài)下植物中的細(xì)胞和組織的分化是按照固定的途徑和方式進(jìn)行的。但在組織培養(yǎng)的愈傷組織中,細(xì)胞分化卻在很大程度上取決于外界環(huán)境因素。在特定的培養(yǎng)條件下,愈傷組織的薄壁細(xì)胞可以保持在同一狀態(tài)下,而不出現(xiàn)分化。通過改變各種環(huán)境因子,如溫度、光照、培養(yǎng)基成分誘導(dǎo)和控制細(xì)胞分化。在實(shí)際生產(chǎn)中對細(xì)胞分化影響最大的物質(zhì)是生長素和蔗糖。此外,有證據(jù)表明細(xì)胞分裂素和赤霉素也參與木質(zhì)部的形成。一般說來,低濃度的生長素對木質(zhì)部的形成有刺激作用,但超過一定水平后,木質(zhì)部的分化程度和生長素的含量就呈現(xiàn)反比的關(guān)系。另外,生長素對維管組織分化的影響似乎與糖的存在有密切聯(lián)系。在較低的生長素水平下,愈傷組織中木質(zhì)部和韌皮部組織的相對形成量可以通過改變培養(yǎng)基中蔗糖的濃度而得到控制。例如,當(dāng)瓊脂中含有0.05mg/L IAA和1%蔗糖時(shí),Syringa愈傷組織中僅出現(xiàn)少量的木質(zhì)部成分。如果IAA水平保持不變,將蔗糖濃度提高1倍,木質(zhì)部的形成量就較多,同時(shí)有少量韌皮部出現(xiàn)。當(dāng)蔗糖濃度達(dá)到2%~4%時(shí),木質(zhì)部和韌皮部組織同時(shí)分化。假如把蔗糖進(jìn)一步提高到5倍,愈傷組織中形成的維管組織的主要成分是韌皮部,僅有少量木質(zhì)部。另外,有的雙糖如麥芽糖和海藻糖(Trehalose)對植物愈傷組織中的導(dǎo)管分化有促進(jìn)作用,而葡萄糖、果糖和其他單糖則沒有這樣的作用。細(xì)胞分裂素對木質(zhì)部分化的促進(jìn)效應(yīng)往往是與生長素協(xié)同作用而產(chǎn)生的。在百日(Zinnia elegans)的單細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞分裂素和生長素的共同使用也促進(jìn)導(dǎo)管成分的分化。赤霉素和生長素之間的相互作用也能對木質(zhì)部的分化產(chǎn)生積極作用。

  無論是在離體還是在活體條件下,植物細(xì)胞分化的研究重點(diǎn)是維管組織的分化,特別是木質(zhì)部成分的分化。由于技術(shù)上的困難,對韌皮部分化過程的研究較少。在經(jīng)過離析的植物組織中,導(dǎo)管分子很容易染色,但小而纖細(xì)的篩管卻不行。導(dǎo)管分子的分化過程現(xiàn)在已成為研究植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞分化問題的一個(gè)模式系統(tǒng)。

  在一個(gè)完整的植株中,組織分化是以一種固定的方式進(jìn)行的,這種方式在不同物種和不同器官中各有不同的特征。在某些已知的條件下,愈傷組織培養(yǎng)物可保持純薄壁組織狀態(tài),不具有任何維管成分,這種愈傷組織對研究各種理論因子對維管組織分化過程的影響是一種很有價(jià)值的系統(tǒng)。

  現(xiàn)在已知,生長素和蔗糖是對維管組織分化過程有顯著影響的兩種物質(zhì),它們能從質(zhì)和量兩個(gè)方面影響維管組織的分化。某些證據(jù)還指出,細(xì)胞分裂素和赤霉素也可能與木質(zhì)部分化過程有關(guān)。

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